非洲猪瘟快检设备如何校准？新手也能学会的操作步骤

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　　非洲猪瘟快检设备如何校准?新手也能学会的操作步骤

　　“检测结果忽阴忽阳，到底是猪有问题还是设备不准?" 这是新手养殖户使用快检设备时的常见困惑。校准是保障检测精度的核心环节，无论是胶体金检测仪还是 PCR 仪，都需按规范操作才能避免误判。以下结合行业实操案例与技术标准，分设备类型拆解校准步骤，新手跟着做就能上手。

　　一、校准前：准备工作与核心原则

　　校准前需明确两个关键原则：一是定期校准，胶体金设备建议每 3 个月校准 1 次，PCR 仪每 6 个月校准 1 次，设备维修后必须重新校准;二是标准合规，需使用批准的标准品(如 ASFV 阳性标准核酸)和配套试剂，不可用普通样本替代。

　　准备工具需备齐四类物品：对应设备的阳性 / 阴性标准品、校准记录表格、未开封新批次配套试剂、设备说明书。校准环境要满足室温 15-30℃、湿度 40%-60%，避免阳光直射和电磁干扰，这是保证校准准确性的基础。

　　二、胶体金快检设备：3 步完成基础校准

　　胶体金检测仪(含检测卡读数仪)结构简单，校准重点在信号识别与判读准确性，新手 10 分钟即可完成。

　　步骤 1：设备自检与归零

　　接通电源后开机，等待设备自检完成(通常显示 “Ready")。按说明书操作进入 “校准模式"，选择 “零点校准"，设备自动清除原有数据，完成后显示 “归零成功"。若归零失败，重启设备重试，这一步能排除残留信号干扰。

　　步骤 2：标准品检测与参数比对

　　取出阳性标准品，按常规流程滴加至配套检测卡，插入读数仪检测。记录 T 线 / C 线比值(如 0.85)，与标准品说明书参考范围(如 0.7-0.9)对比。再用阴性标准品检测，确认读数应<0.1(具体以设备标准为准)。

　　步骤 3：结果验证与记录

　　两次检测数值均在范围内则校准通过;若超出范围，更换新批次试剂重试。校准后填写记录，注明设备型号、日期、标准品批号及数值，作为追溯依据。

　　三、PCR 快检设备：5 步精准校准(以荧光定量 PCR 仪为例)

　　PCR 仪校准核心是温控精度与荧光灵敏度，需严格操作，全程约 30 分钟。某省疫控中心曾因温控失准导致检测停摆，印证了校准的重要性。

　　步骤 1：设备预热与程序调取

　　开机预热 30 分钟，确保加热模块稳定。进入菜单选择 “校准程序"，校准可导入厂家提供的 ASFV B646L 基因校准模板。

　　步骤 2：温控模块校准

　　将标准温度探针插入反应孔，设置 95℃(变性)、55℃(退火)、72℃(延伸)三个关键点。启动程序后，实际温度误差需≤±0.5℃。若显示 “温度传感器异常" 等报错，可能是硬件故障，需联系厂家维修。

　　步骤 3：荧光通道校准

　　取 FAM 通道标准荧光微球，按 1:10 稀释后加入反应管检测。荧光强度值与参考值偏差需<10%，多通道设备需逐个校准。

　　步骤 4：扩增效率验证

　　用已知浓度的 ASFV 阳性标准核酸(如 1000 拷贝 /μL)配制反应体系，运行校准程序。扩增效率应在 90%-110% 之间，否则调整程序参数。

　　步骤 5：报告生成与确认

　　校准通过后打印自动生成的报告存档。未通过需先检查试剂是否过期、标准品是否失效，排除后重试。

　　四、新手避坑指南：4 个关键注意事项

　　标准品不可替代：必须用合规标准品，实际样本无法保证溯源性，这是检测认可的基本要求。

　　周期灵活调整：闲置超期需重新校准，潮湿地区可将胶体金设备校准间隔缩至 2 个月。

　　故障科学处理：多次校准失败时，若设备弹出传感器报错，不要自行拆机，应联系厂家或具备计量认证资质的第三方机构。

　　维护联动校准：定期清洁设备光学部件、检查密封性，可减少校准频次，延长设备寿命。

　　河南某猪场曾因未及时校准漏检 5 头病猪，损失超 10 万元。新手只要按步骤操作，同时做好日常维护，就能让快检设备始终保持 “火眼金睛"，筑牢防疫道防线。